La serie original sigue las aventuras de la nave estelar USS Enterprise, y su tripulación, liderada por el Capitán James Tiberius Kirk (William Shatner), su primer oficial el Dr. Spock (Leonard Nimoy), el médico jefe Leonard McCoy (DeForest Kelley) y la oficial de comunicaciones, la teniente Nyota Uhura (Nichelle Nichols).
La voz de William Shatner servía de introducción para cada episodio en los créditos iniciales, en el que se establecía el propósito de la nave:
- El espacio: la última frontera. Estos son los viajes de la nave estelar «Enterprise», su misión de cinco años, la exploración de mundos desconocidos, el descubrimiento de nuevas vidas y nuevas civilizaciones, llegar con audacia a donde ningún hombre ha llegado anteriormente.
En tiempos en los que la segregación racial estaba firmemente arraigada en varias áreas de Estados Unidos, Roddenberry previó una tripulación multirracial y con diversidad de género, basado en su hipótesis de que los prejuicios raciales y el sexismo no existirían en el siglo XXIII. También incluyó un personaje recurrente de una raza alienígena, Spock (mitad humano, mitad vulcaniano), ambas razas unidas bajo la bandera de la Federación Unida de Planetas.
Star Trek TOS, fue además, la primera serie en televisión que introdujo un beso interracial.
A los fans de esta serie, que son legión en todo el mundo, se les conocía como trekkie, aunque como el típico fan era lo que se denomina un empollón o un friki, algunos fans se sentían molestos con este término que era usado en modo despectivo, por lo que se acuñó el término trekker. Hoy en día se usan casi indistintamente, y de hecho son muchos los fans de la serie que se sienten orgullosos en autodenominarse trekkies.
- La tripulación reunida en el puente
- del Enterprise.